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豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒

上市日期: 2017-06-08

【作用與用途】用于檢測豬血清或血漿中豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)抗體。

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豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒說明書

獸用

獸藥名稱

通用名稱:豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒

商品名稱:無

英文名稱:ELISA Kit for Detecting Antibody of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus

漢語拼音:Zhu Fanzhiyuhuxizonghezheng Bingdu ELISA Kangti Jiance Shijihe

【主要成分與含量】

編號

試劑盒組分

數量

用法

1P

2P

5P

PRRSV I-I

PRRSV I抗原包被板

96孔板×1

96孔板×2

96孔板×5

直接使用

PRRSV I-II

樣品稀釋液

10ml×1

20ml×1

50ml×1

直接使用

PRRSV I-III

PRRSV陰性血清

500μl×1

1 ml×1

2 ml×1

直接使用

PRRSV I-IV

PRRSV陽性血清

500μl×1

1 ml×1

2 ml×1

直接使用

WB-V

洗滌液20×

30ml×1

30ml×2

100ml×1

20倍稀釋后使用

PRRSV I-VI

酶標抗體

10ml×1

20ml×1

50ml×1

直接使用

CA-VII

底物溶液A

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

CB-VIII

底物溶液B

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

SS-IX

終止液

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

【作用與用途】用于檢測豬血清或血漿中豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)抗體。

【用法與判定】

1、實驗準備

1)為保證不同樣品的孵育時間一致,可先取待檢樣品不低于10μl和陰性血清(III)、陽性血清(IV)不低于100μl分別加入96孔板(單獨準備)中并做好記錄,然后用多道移液器移至PRRSV I抗原包被板(I)相應孔中。也可在PRRSV I抗原包被板(I)直接加樣。

2)試劑盒各個組分在使用前均須恢復至室溫(20~25℃),加液前充分搖勻。

2、操作步驟

PRRSV I抗原包被板(I)上PRRSV陰性血清(III)、PRRSV陽性血清(IV)和樣品的分布如圖NPS所示


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

N

S5











B

N












C

P












D

P












E

S1












F

S2












G

S3












H

S4












1)每孔加入100μl樣品稀釋液(II),A1B1C1D1孔不加樣品稀釋液(II);

2)在A1B1孔加入PRRSV陰性血清(III)各100μl

3)在C1D1孔加入PRRSV陽性血清(IV)各100μl

4)剩余孔加入10μl樣品用于檢測;

5)輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),37℃孵育30分鐘;

6)將洗滌液20×V)用純水或去離子水做20倍稀釋,即為工作濃度的洗滌液

7)甩干PRRSV I抗原包被板孔中的液體,每孔加入300μl洗滌液,洗滌3次,在洗滌和加入下一個試劑前,避免孔壁變干;

8)每孔加入100μl的酶標抗體(VI);

937℃孵育30分鐘;

10)甩干PRRSV I抗原包被板孔中的液體,每孔加入300μl洗滌液,洗滌3次,在洗滌和加入下一個試劑前,避免孔壁變干;

11)每孔加入50μl底物溶液AVII);

12)每孔再加入50μl底物溶液BVIII);

1337避光孵育10分鐘;

14)每孔加入50μl的終止液(IX)終止顯色反應;

15)使用酶標儀測定450nm波長處的OD值。

3、結果判定

1PRRSV陰性血清(III)的平均OD值即ODNC應≤0.3PCV2陽性血清(IV)的平均OD值即ODPC應≥0.6,試驗結果有效;否則重新進行試驗;

2閾值計算(Cut Off值):Cut Off=ODNC×2.1(若ODNC≥0.05則按實際值計算;若ODNC0.05則按0.05計算);

3)樣品的OD值即ODS

4ODSCut Off值,結果判為陰性;ODS ≥Cut Off值,結果判為陽性。

【注意事項】

1)需自備的試驗用器材:96孔板、100μl200μl的單道或多道微量移液器,吸頭,酶標儀,純水或去離子水。

2)底物溶液AVII)和底物溶液BVIII)避免接觸氧化物,出現顏色變化,應棄之不用,底物溶液BVIII)應避光保存。

3)終止液(IX)為稀硫酸溶液,避免接觸氧化物,若接觸到皮膚或眼睛,請及時用大量清水洗滌并就醫。

4)需稀釋的組分洗滌液20×V)在稀釋時應準確量取,如果發現有結晶應加熱使其溶解后使用。

5)在操作過程中,盡量避免將氣泡加入檢測孔中。

【規格】? 196/ 2192/ 3480/

【貯藏與有效期】 ?2~8℃保存,有效期12個月。

【生產企業】

企業名稱:青島立見診斷技術發展中心

企業地址:青島市城陽區紅島街道岙東南路21

郵編:266114

電話:0532-87839766

傳真:0532-87839766

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郵編:330520


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