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小反芻獸疫病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒

上市日期: 2017-06-06

【作用與用途】 用于檢測綿羊、山羊血清或血漿中小反芻獸疫病毒(PPRV)抗體。

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小反芻獸疫病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒說明書

獸用

獸藥名稱

通用名稱:小反芻獸疫病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒

商品名稱:無

英文名稱:Blocking ELISA Kit for Detecting Antibody of Peste des Petits Ruminants Virus

漢語拼音:Xiaofanchushouyi Bingdu Jingzheng ELISA Kangti Jiance Shijihe

【主要成分與含量】

編號

試劑盒組分

數量

用法

1P

2P

5P

PPRV B-I

PPRV B抗原包被板

96孔板×1

96孔板×2

96孔板×5

直接使用

PPRV B-II

樣品稀釋液

7ml×1

14ml×1

35ml×1

直接使用

PPRV B-III

PPRV陰性血清

100μl×1

200μl×1

500μl×1

直接使用

PPRV B-IV

PPRV陽性血清

100μl×1

200μl×1

500μl×1

直接使用

PPRV B-V

洗滌液20×

12ml×1

24ml×1

60ml×1

20倍稀釋后使用

PPRV B-VI

酶標抗體

1ml×1

1ml×2

5ml×1

5倍稀釋后使用

PPRV B-VII

吐溫-20

120μl×1

240μl×1

600μl×1

直接使用

PPRV B-VIII

底物溶液

5ml×1

10ml×1

25ml×1

直接使用

PPRV B-IX

終止液

5ml×1

10ml×1

25ml×1

直接使用

【作用與用途】用于檢測綿羊、山羊血清或血漿中小反芻獸疫病毒(PPRV)抗體。

【用法與判定】

1、實驗準備:試劑盒各個組分在使用前均須恢復至室溫(20~25℃),加液前充分搖勻。

2、操作步驟

PPRV B抗原包被板(I)上PPRV陰性血清(III)、PPRV陽性血清(IV)、樣品稀釋液(II)和樣品的分布如圖NPCmS所示


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

N

S5











B

N












C

P












D

P












E

S1












F

S2












G

S3












H

S4












1)在A1B1孔加入PPRV陰性血清(III)各50μl

2)在C1D1孔加入PPRV陽性血清(IV)各50μl

3)在E1F1孔加入樣品稀釋液(II)各50μl

4)剩余孔加入25μl樣品稀釋液(II),然后加入25μl樣品用于檢測;

5)輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),37℃孵育60分鐘;

6將洗滌液20×V)用純水或去離子水做20倍稀釋,再按0.5‰比例加入吐溫-20VII),即為工作濃度的洗滌液

7)甩干PPRV B抗原包被板孔中的液體,每孔加入300μl洗滌液,洗滌4次,在洗滌和加入下一個試劑前,避免孔壁變干;

8將酶標抗體VI)用樣品稀釋液(II)做5倍稀釋,即為工作濃度的酶標抗體;每孔加入50μl的酶標抗體

937℃孵育30分鐘;

10)甩干PPRV B抗原包被板孔中的液體,每孔加入300μl洗滌液,洗滌4次,在洗滌和加入下一個試劑前,避免孔壁變干;

11)每孔加入50μl底物溶液(VIII);

12)室溫下避光孵育15分鐘;

13)每孔加入50μl的終止液(IX)終止顯色反應;

14)使用酶標儀測定450nm波長處的OD值。

3、結果判定

1PPRV陰性血清(III)的平均OD值即ODNCPPRV陽性血清(IV)的平均OD值即ODPC;酶標抗體平均OD值即ODCm;樣品的OD值即ODS

2)按照以下方法計算阻斷率PI

陽性血清阻斷率即PIPC

PIPC=100-

ODPC

×100

ODCm

陰性血清阻斷率即PINC

PINC=100-

ODNC

×100

ODCm

樣品阻斷率即PIS

PIS=100-

ODS

×100

ODCm

3)根據阻斷率判定檢驗結果,PIPC>60PINC<40,試驗結果有效;否則重新進行試驗;PIS>50,結果為陽性;PIS≤50,結果為陰性。

【注意事項】

1)需自備的試驗用器材:96孔板、100μl200μl的單道或多道微量移液器,吸頭,酶標儀,純水或去離子水。

2)底物溶液(VIII)避免接觸氧化物,出現顏色變化,應棄之不用,應避光保存。

3)終止液(IX)為稀硫酸溶液,避免接觸氧化物,若接觸到皮膚或眼睛,請及時用大量清水洗滌并就醫。

4)需稀釋的組分洗滌液20×V)在稀釋時應準確量取,如果發現有結晶應加熱使其溶解后使用。

5)在操作過程中,盡量避免將氣泡加入檢測孔中。

【規格】? 196/ 2192/ 3480/

【貯藏與有效期】 ?2~8℃保存,有效期12個月。

【生產企業】

企業名稱:青島立見診斷技術發展中心

企業地址:青島市城陽區紅島街道岙東南路21

郵編:266114

電話:0532-87839766

傳真:0532-87839766

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郵編:330520


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