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雞新城疫血凝抑制試驗陽性血清?

上市日期: 2017-03-22

【批準文號】獸藥生字(2012)150138082

抗原含有滅活的雞新城疫病毒,血凝效價應≥ 1:512。陽性血清為雞新城疫高免的SPF雞血清, HI效價應 1:512。陰性血清為 SPF雞血清。

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雞新城疫血凝抑制試驗抗原、陽性血清與陰性血清說明書

獸用非處方藥

【獸藥名稱】

通用名稱:雞新城疫血凝抑制試驗抗原、陽性血清與陰性血清

商品名稱:無

英文名稱:Newcastle Disease Hemagglutination Inhibition Test AntigenPositive Sera and Negative Sera

漢語拼音:Ji Xinchengyi Xueningyizhishiyan KangyuanYangxingxueqing Yu Yinxingxueqing

【主要成分與含量】

抗原含有滅活的雞新城疫病毒,血凝效價應≥1:512。陽性血清為雞新城疫高免的SPF雞血清,HI效價應≥1:512。陰性血清為SPF雞血清。

【性狀】

抗原為微黃色海綿狀疏松團塊,易與瓶壁脫離,加稀釋液后迅速溶解;陽性血清和陰性血清均為微黃色海綿狀疏松團塊,易與瓶壁脫離,加稀釋液后迅速溶解。

【作用與用途】用于血凝抑制試驗檢測雞新城疫抗體。

【用法與判定】

1? 血凝(HA)試驗操作方法

1.1 V型微量反應板中,每孔加0.025ml PBS溶液。

1.2 1孔加入0.025ml抗原,依次作0.025ml的對倍稀釋至第11孔;為精確計算血凝單位,病毒懸液開始需作一系列密集稀釋,如1/31/41/51/6等。

1.3 每孔加0.025ml PBS溶液。

1.4 每孔加0.025ml 1%V/V)雞紅細胞懸液。

1.5 將反應板在振蕩器上振蕩1~2分鐘或輕叩反應板混合反應物,室溫(20~25℃)靜置15~30分鐘或2~8 45~60分鐘,當對照孔的紅細胞顯著呈紐扣狀時判定結果。

1.6 結果判定? 將反應板傾斜60°,觀察紅細胞有無呈淚珠樣流淌,完全無淚珠樣流淌(100%凝集)的最高稀釋倍數為血凝效價。表示1HA單位(HAU),再根據開始的稀釋倍數精確計算血凝效價。

2? 血凝抑制(HI)試驗操作方法

2.1 根據HA測定的效價,計算配制4個血凝單位(4HAU)抗原。

2.2 反應板中每孔加入0.025ml PBS

2.3 1孔中加入0.025ml血清。

2.4 在反應板上將血清做橫向0.025ml的對倍稀釋,至第10孔。

2.5 在第1孔至第11孔中,每孔加入0.025ml4HAU抗原,室溫下(20~25℃)靜置30分鐘或2~8 45~60分鐘。

2.6 每孔加入0.025ml 1%V/V)的雞紅細胞懸液,輕晃混勻后,室溫(20~25℃)靜置20~40分鐘或2~8 45~60分鐘,當對照孔紅細胞呈顯著紐扣狀時判定結果。

2.7 結果判定? 以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數判為該血清的HI效價。當陽性血清的HI效價與已知效價誤差不超過1個滴度,陰性血清效價不高于1:4時,試驗方可成立。被檢樣品HI效價≤1:4判為陰性;等于1:8判為可疑(可疑樣品應重檢,重檢效價≥1:8判為陽性,<1:8判為陰性);≥1:16判為陽性。

【注意事項】

1HAHI試驗影響因素甚多,應嚴格控制試驗條件,準確控制紅細胞懸液和抗原工作濃度,同時應嚴格控制溫度和作用時間。

2)用pH7.0~7.2PBS作稀釋液。

3)抗原和陰、陽性血清若有污染,應廢棄。

4)使用時應先測抗原的血凝價,根據所測結果,配制4個血凝單位的抗原,配好后的抗原應在2小時內用完。

5)抗原開封后2~8℃保存,應不超過3個月。切忌反復凍融。

【規格】? 抗原、陽性血清和陰性血清:(11ml/ 22ml/

【貯藏與有效期】? 2~8℃保存,抗原、陽性血清和陰性血清有效期均為24個月。

【包裝】 10/



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